Evaluation of the humoral immune response and cross reactivity against Mycobacterium tuberculosis of mice immunized with liposomes containing glycolipids of Mycobacterium smegmatis.

Mycobacterium smegmatis (Ms) is a nonpathogenic mycobacteria of rapid growth, which shares many characteristics with Mycobacterium tuberculosis (MTB), the major causative agent of tuberculosis. MTB has several cell wall glycolipids in common with Ms, which play an important role in the pathogenesis of tuberculosis and the induction of a protective immune response against MTB infection in some animal models. In this study, the humoral immune response and cross reactivity against MTB, of liposomes containing a mixture of cell wall glycolipids of Ms and commercial lipids was evaluated, in order to study its possible use as a component of a vaccine candidate against tuberculosis. Liposomes containing total lipids extracted from Ms, distearoyl phosphatidyl choline and cholesterol were prepared by the dehydration-rehydration technique. Balb/c mice were immunized with the liposomes obtained and the antibody response and cross reactivity against MTB were tested by ELISA. Total lipids extract from Ms showed the presence of several polar glycolipids in common with MTB, such as phosphatidylinositol mannosides. Liposomes that contained glycolipids of Ms were capable of inducing a specific IgG antibody response that allowed the recognition of surface antigens of MTB. The results of this study demonstrated the presence of immunogenic glycolipids in Ms, which could be included to enhance the protective effects of subunit vaccine formulations against tuberculosis.

Phage display of functional αß single-chain T-cell receptor molecules specific for CD1b:Ac2SGL complexes from Mycobacterium tuberculosis-infected cells.

The development of molecules specific for M. tuberculosis-infected cells has important implications, as these tools may facilitate understanding of the mechanisms regulating host pathogen interactions in vivo. In addition, development of new tools capable to targeting M. tuberculosis-infected cells may have potential applications to diagnosis, treatment, and prevention of tuberculosis (TB). Due to the lack of CD1b polymorphism, M. tuberculosis lipid-CD1b complexes could be considered as universal tuberculosis infection markers. The aim of the present study was to display on the PIII surface protein of m13 phage, a human αß single-chain T-cell receptor molecule specific for CD1b:2-stearoyl-3-hydroxyphthioceranoyl-2´-sulfate-α-α´-D-trehalose (Ac2SGL) which is a complex presented by human cells infected with M. tuberculosis. The results showed the pIII fusion particle was successfully displayed on the phage surface. The study of the recognition of the recombinant phage in ELISA and immunohistochemistry showed the recognition of CD1b:Ac2SGL complexes and cells in human lung tissue from a tuberculosis patient respectively, suggesting the specific recognition of the lipid-CD1b complex.

Evaluation of enteric-coated tablets as a whole cell inactivated vaccine candidate against Vibrio cholerae.

A vaccine candidate against cholera was developed in the form of oral tablets to avoid difficulties during application exhibited by current whole cell inactivated cholera vaccines. In this study, enteric-coated tablets were used to improve the protection of the active compound from gastric acidity. Tablets containing heat-killed whole cells of Vibrio cholerae strain C7258 as the active pharmaceutical compound was enteric-coated with the polymer Kollicoat(®) MAE-100P, which protected them efficiently from acidity when a disintegration test was carried out. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) anti-lipopolysaccharide (LPS) inhibition test and Western blot assay revealed the presence of V. cholerae antigens as LPS, mannose-sensitive haemagglutinin (MSHA) and outer membrane protein U (Omp U) in enteric-coated tablets. Immunogenicity studies (ELISA and vibriocidal test) carried out by intraduodenal administration in rabbits showed that the coating process of tablets did not affect the immunogenicity of V. cholerae-inactivated cells. In addition, no differences were observed in the immune response elicited by enteric-coated or uncoated tablets, particularly because the animal model and immunization route used did not allow discriminating between acid resistances of both tablets formulations in vivo. Clinical studies with volunteers will be required to elucidate this aspect, but the results suggest the possibility of using enteric-coated tablets as a final pharmaceutical product for a cholera vaccine.

Cross-protection among unrelated leptospira pathogens serovars: an unfinished story.

BACKGROUND: The World Health Organization considers leptospirosis the most neglected zoonotic disease in the last decades. One of the major obstacles in the developing of vaccines for the prevention of leptospirosis is the absence of cross-protection among unrelated serovars. It is accepted that cross-protection among related serovars is due to antibodies generated against lipopolysaccharides (LPs), whereas a cross-protection among unrelated serovars is rarely observed. OBJECTIVES: The objective of the study was to ascertain the existence of cross-protection among vaccine strains of different serovars. RESULTS: The results of this research demonstrated that a cross-protection among unrelated Leptospira serovars strain is possible. The Canicola strain is able to induce protection against homologous, Ballum and Copenhageni strains. The Mozdok strain induced protection only against a homologous challenge. Other strains showed a moderate cross-protection against a heterologous challenge. CONCLUSIONS: These findings suggest that the Canicola and Mozdok strains are ideal candidates for developing a new vaccine formulation for use in Cuba.

The importance of animal models in tuberculosis vaccine development.

Research, development, and production of vaccines are still highly dependent on the use of animal models in the various evaluation steps. Despite this fact, there are strong interests and ongoing efforts to reduce the use of animals in vaccine development. Tuberculosis vaccine development is one important example of the complexities involved in the use of animal models for the production of new vaccines. This review summarises some of the general aspects related with the use of animals in vaccine research and production, as well as achievements and challenges towards the rational use of animals, particularly in the case of tuberculosis vaccine development.

Ensayo de inmunogenicidad y toxicidad local del cocleato de Neisseriameningitidis en ratas Sprague Dawley / Study of immunogenicity and local toxicity of the Neisseria meningitidis cochleate in Sprague Dawley rats

Los estudios de tolerancia local para productos vacunales resultan fundamentales como requisitos regulatorios para los estudios preclínicos. En este ensayo se utilizaron 48 ratas Sprague Dawley, de ambos sexos, con un peso corporal de 180-220 g, suministradas por el Centro Nacional para la Producción de Animales de Laboratorio, y una duración de 17 días. Las ratas fueron distribuidas en 5 grupos: 3 con diferentes concentraciones de cocleatos, uno sin inocular y otro que recibió el diluente del producto en prueba. A estas se les realizaron las observaciones clínicas necesarias, tales como: mediciones de incremento de peso, consumo de alimentos y agua, así como la evaluación anatomopatológica en los dos tiempos de sacrificio, uno a los 12 y otro a los 17 días; se enfatizó en el estudio histopatológico de encéfalo y las fosas nasales en tres niveles de su extensión. Se hicieron investigaciones inmunológicas consistentes en la determinación de IgG en suero, saliva y líquido cefalorraquídeo. Los resultados arrojaron un incremento del peso. En el consumo de agua y alimento no se observaron alteraciones clínicas, la anatomopatología evidenció discretos cambios inflamatorios que guardaron una relación directa con el aumento de las concentraciones del producto, los títulos de IgG en la saliva y suero de las ratas inoculadas con los cocleatos difirieron de forma significativa (P < 0,05) respecto a los grupos controles, el líquido cefalorraquídeo resultó negativo a la presencia de anticuerpos específicos IgG. Se concluye que los cocleatos aplicados por esta vía en ratas resultaron inmunogénicos e inocuos para el referido producto(AU)

Local Tolerance studies for vaccine products are a main link in the chain of Regulatory Requirements for toxicological preclinical studies. Mainly considering that the use of mucosal road seems to be a current tendency due to the advantages it offers. Sprague Dawley rats of both sexes weighing 100-120 g (reception weight) provided by CENPALAB with the corresponding certificates of sanitary and genetic quality were used in this test. Local tolerance study lasted 17 days. Rats were distributed in 5 groups (3 groups with different cochleate concentrations, one without inoculation and another one that received the diluents of the product in test. Measurement of weight increase, food and water consumption, as well as the anatomopathologic studies in the two times of sacrifice, at 12 and 17 days were performed. Main histopathological studies were carried out in brain and nasal nostrils in three levels of their extension (anterior, medium and posterior areas). In addition, immunological assays such as the determination of IgG in serum, saliva and cerebrospinal fluid (CSF) were carried out. Results showed a sustained weight increase. There were no clinical alterations during water and food consumption, while the existence of discreet acute inflammatory changes was found by anatomopathological studies, which were directly related to the increase of the product concentration. The presence of IgG antibodies in saliva and in sera of the rats inoculated with the cochleates showed significant differences (P <0.05) compared to the non inoculated control group and to the animals inoculated with the diluent. CSF studies resulted negative regarding the presence of specific IgG antibodies. The existence of a direct relation among the concentrations of the product in test and the inflammatory processes in the medium and posterior levels of the nasal nostril was proven, therefore it is considered that cochleates applied by this route and in the concentrations ...(AU)

Utilidad del modelo animal ratón-pulmón para evaluar la virulencia de posibles cepas vacunales de Shigella spp / Usefulness of lung-mouse animal model to evaluate the virulence of Shigella spp candidate vaccine straims

Shigella flexneri y Shigella sonnei, como cualquier otra especie del género Shigella, se sitúan entre los principalesagentes etiológicos de las enfermedades diarreicas agudas, sobre todo aquellas que ocurren en los países en vías dedesarrollo, aunque por la baja dosis infectante de este enteropatógeno no se excluyen los países desarrollados. Estasituación conlleva a la elaboración de vacunas para prevenir esta enfermedad y la necesidad de un modelo animal quepruebe la eficacia protectora e inmunogénica de posibles candidatos vacunales contra la shigellosis, situación que ha motivado numerosos estudios por la dificultad de demostrar la enteropatía intestinal en los monos y humanos. Lo anteriormente expuesto, más la capacidad de Shigella spp para mostrar resistencia a los ntimicrobianos, motivó la realización de este trabajo. En el mismo se constató la utilidad del modelo animal ratón-pulmón para evaluar la virulencia de candidatos vacunales a partir de este microorganismo. Se utilizó la técnica de inoculación intranasal con una concentración entre 107 y 109 UFC de cepas de Shigella flexneri y Shigella sonnei. Por todos los resultadosobtenidos con el modelo animal ratón-pulmón se concluyó que este modelo puede ser eficiente para los estudiospreclínicos de cualquier candidato vacunal a partir de Shigella spp(AU)

Shigella flexneri and Shigella sonnei, as other species of Shigella, are among the main etiological agents of acute diarrhoeal diseases worldwide, specially in developing countries, although we do not exclude developed ones, because of their low infective dose, between 10 and 100 colonies. This leads to the preparation of vaccines to prevent this illness and the need for an animal model to demonstrate the protective and immunogenic effectiveness of the shigellosis candidate vaccines. Many studies have been carried out since the intestinal enteropathy is difficult to demonstrate in monkeys and humans. The aforementioned and the capacity of Shigella sp to become resistant to antibiotic treatments motivated our study. In it we demonstrated theusefulness of the mouse-lung animal model to evaluate the virulence of vaccine candidates. Intranasal inoculation with Shigella flexneri and Shigella sonnei in concentration on between 107 and 109 CFU was used. The conclusion was that the lung-mouseanimal model can result efficient for preclinical studies of any Shigella spp vaccine candidate(AU)

Biomodelo para la evaluación de cepas atenuadas como candidatosvacunales contra el cólera humano I: estudio de la virulencia, capacidadde colonización y adherencia a la mucosa intestinal / Biomodel for evaluating attenuated Vibrio cholerae strains as human cholera vaccine candidates I: virulence, colonizing capacity and adherence to the intestinal mucosa

El cólera continúa siendo en muchos países un problema para la salud humana, manteniéndose como una enfermedad epidémica o endémica que afecta tanto a niños como adultos y causa la muerte en casos no tratados. Una vacuna viva oral contra esta enfermedad puede ser la solución. En el presente trabajo se seleccionó y aplicó un biomodelo para la evaluación de cepas atenuadas genéticamente de Vibrio cholerae como candidatas vacunales contra el cólera. La virulencia, capacidad de colonización y adherencia a la mucosa intestinal de las cepas fueron evaluadas mediante el usode ratones neonatos de 2 a 4 días de nacidos de la línea Balb/c, con un peso entre 1,5-2 g. Los resultados obtenidos con este biomodelo demostraron que las cepas atenuadas genéticamente son no virulentas, colonizan y se adhieren a lamucosa intestinal. Se concluye que el biomodelo utilizado permite la evaluación y selección de cepas candidatas para vacunas vivas orales contra el cólera(AU)

Cholera is still a human health problem in many countries. It is an epidemic or endemic disease affecting both children and adults that causes death of untreated cases. A live oral vaccine could be the solution against this disease. In the present study a biomodel was selected and applied for the evaluation of genetically attenuated Vibrio cholerae strains as vaccinecandidates. The virulence, colonizing capacity and adherence to the intestinal mucosa of the strains were evaluated using 2-4 day-old neonatal Balb/c mice, weighing from 1.5-2 g. The results obtained with this biomodel showed that genetically attenuated strains are not virulent, colonize and adhere to the intestinal mucosa. The conclusion was that the biomodel used allows the evaluation and selection of candidate strains for live oral cholera vaccines(AU)

Study of a Leptospirosis Outbreak in Honduras Following Hurricane Mitch and Prophylactic Protection of the vax-SPIRAL® Vaccine.

Honduras was one of the Central American countries most severely hit by Hurricane Mitch. Torrential rains and heavy flooding created conditions conducive to a leptospirosis outbreak in the country. A group of Cuban scientists studied 68 patients from the Department of Cort�s - one of the country's hardest hit areas - presenting clinical and epidemiological profiles indicative of leptospirosis. Blood and serum samples were taken from all subjects. A microscopic agglutination test (MAT) was used to identify Leptospira strains and to assess protection conferred by vax-SPIRAL® (Cuban leptospirosis vaccine) against the isolated strain. Prevalence of leptospires in the kidneys and liver was also verified. A male predominance was found in the group aged 15-49 years. Municipalities in this Department with the largest number of cases were San Pedro Sula, La Lima, and Chamelec�n. The most frequent symptoms included fever, headache, myalgia, and generalized discomfort. Over 80% of subjects reported presence of rodents in their homes, as well as contact with stagnant water and domestic animals. The strain isolated from positive blood cultures was from the Icterohaemorrhagiae serogroup, which was highly virulent in the animal model used. Protection was 100% in hamsters inoculated with vax-SPIRAL® and subsequently challenged with the Honduran strain. Additionally, macroscopic analysis of organs from immunized animals that survived the challenge showed no signs of leptospirosis infection.

Evaluación de la toxicidad por dosis única de la vacuna antitetánica vax-TET en ratas Sprague Dawley / Evaluation of toxicity by single dose of the tetanus vaccine vax-TET in Sprague Dawley rats

La vacuna vax-TET® está indicada en la prevención del tétanos y es efectiva si se logra un completo y apropiado esquema de inmunización. Para investigar el potencial tóxico de este producto se realizó una prueba toxicológica con una dosis única, por vía intramuscular, en un volumen de 0,2 mL en ratas Sprague Dawley. La composición de la vacuna de ensayo probada fue la misma de la vacuna comercial. Los animales fueron observados diariamente en buscade síntomas locales y sistémicos de toxicidad. Se realizaron mediciones del consumo de agua y alimento, así como del peso corporal. Dos semanas después de la inoculación las ratas fueron sacrificadas por métodos de eutanasia sin dolor y sometidas a necropsia. No se observaron muertes ni síntomas de toxicidad en los animales estudiados. Tampoco se encontraron diferencias de interés toxicológico entre los grupos experimentales en cuanto a las variables medidas. El estudio anatomopatológico reveló la presencia de formaciones granulomatosas de tipo macrofágico asociadas, fundamentalmente, al hidróxido de aluminio. Estos resultados permitieron concluir que, bajo las condiciones delestudio y según los criterios establecidos, esta vacuna no produce efectos adversos en el modelo animal usado, por lo que se considera potencialmente no tóxica para humanos(AU)

The tetanus vaccine vax-TET® is indicated for the prevention of tetanus and it is effective if a complete and adequate immunization scheme is achieved. In order to investigate the toxic potential of this product, a toxicological test at single dose(0,2 ml), by intramuscular route was developed in Sprague Dawley rats using the same substance concentrations suggested by the manufacturer. The animals were daily observed looking for local and systemic symptoms of toxicity. Water and food consumption and body weight were also monitored during the experiment. Two weeks after inoculation, rats were slaughteredand submitted to necropsy studies. No deaths or toxicity symptoms were observed in the animals studied. No differences of toxicological interest were found among experimental groups regarding the variables measured. The anatomic-pathological study showed the presence of granulomatous formations mainly associated to aluminium hydroxide in the formulation. It wasconcluded that under the study conditions and following the established criteria, this vaccine does not produce any adverse reactions in the animal model used, suggesting a low potential toxicity in humans(AU)

Estudio de un brote de leptospirosis en Honduras tras el paso del huracán Mitch y potencialidad profiláctica de vax-SPIRAL®

En Honduras, uno de los países de Centroamérica más afectados por el huracán Mitch, debido a las fuertes lluvias e inundaciones, se crearon las condiciones idóneas para el desarrollo de un brote de leptospirosis. Un grupo de especialistas cubanos realizamos unestudio a 68 pacientes con un cuadro clínico epidemiológico sospechoso de leptospirosis entre los pobladores del Departamento de Puerto Cortés, una las regiones más comprometidas. A todos los pacientes se les tomó una muestra de sangre para hemocultivo y obtención de suero. Se empleó la técnica de aglutinación microscópica (MAT) para la identificación de las cepas de leptospira y para evaluar la protección conferida por vax-SPIRAL® (vacuna antileptospirósica cubana) frente al reto con la cepa aislada y se verificó la prevalencia de leptospiras en los riñones e hígado. Se observó un predominio de pacientes del sexo masculino, en un grupo entre 15-49 años. Los municipios de este Departamento con un mayor número de casos fueron San Pedro Sula, La Lima yChamelecón. Los síntomas más frecuentes fueron: fiebre, cefalea, mialgias, malestar general, entre otros. Más del 80 por ciento de los individuos manifestaron la presencia de roedores en sus viviendas y que tuvieron contacto con aguas estancadas y animalesdomésticos. La cepa aislada del hemocultivo positivo fue del serogrupo Icterohaemorrhagiae, muy virulento en el modelo animal empleado. Se evidenció el 100 por ciento de protección de los hámsteres inmunizados con vax-SPIRAL® y retados con la cepa de Honduras. El análisis macroscópico de los órganos de los animales inmunizados que sobrevivieron al reto al 100 or ciento, reveló la ausencia de signos característicos de la infección(AU)

Hurricane Mitch affected Central America with vast flooding caused by rainfall resulting in leptospirosis outbreaks. Honduras was one of themost affected countries, where a group of researchers worked in the isolation and confirmation of this outbreak. 68 patients from different locations of Puerto Cortes Department with suspicious symptoms of Leptospirosis were studied. All of them were taken a blood samples for hemoculture and serum obtaining. Microscopic agglutination technique (MAT) was used to identify leptospira strains and to evaluate the protection conferred by vax-SPIRAL® (Cuban leptospiral vaccine) against challenge with the isolated strain and verify the prevalence of leptospira in kidneys and liver. A predominance of male patients was observed in a group between 15-49 years. Municipalities of thisdepartment with greater number of cases were San Pedro Sula, La Lima and Chamelecón. The most frequent symptoms were: fever, headache, myalgias, general discomfort among others. More than 80 percent of individuals manifested presence of rodents in their housing and had contact with accumulated water and domestic animals. The isolated strain of the positive hemoculture was from serogrupo Icterohaemorrhagiae, very virulent in the animal model used. 100 per cent protection of hamsters immunized with vax-SPIRAL® and challengedwith the Honduras strain was evidenced while microscopic analysis of immunized animal organs which survived to the challenge at 100 percent revealed absence of signs characteristic of infection(AU)

Inmunoprotección de componentes de membrana externa de Leptospira pomona serovar mozdok / Leptospira pomona serovar mozdok obtained by Sodium Dodecyl Sulfate (SDS) solubilization

Los componentes de membrana externa (CME) de Leptospira son candidatos potenciales para la producción devacunas contra la leptospirosis. En este trabajo se inmunizaron hámsters y conejos con variantes de vacunas de CME solubilizados en SDS y adsorbidas en gel de hidróxido de aluminio. Se emplearon dos dosis por vía intramuscular, con un intervalo de 6 semanas. Las dosis empleadas fueron de 25, 5 y 2,5 µg para hámsters y 25 µg para conejos. La respuesta humoral se evaluó mediante microaglutinación (MAT) y el ensayo inmunoabsorbente de unión a la enzima (ELISA). Se evaluó además el carácter protector de la respuesta inducida por estas preparaciones mediante el reto delos hámsters inmunizados, contra 20 000 dosis letal 50 por ciento (DL50) de la cepa homóloga altamente virulenta y mediante inmunización pasiva. Para ello se utilizó el suero de los conejos obtenidos en la semana 8 frente a 10 000 DL50. La MAT y el ELISA evidenciaron el poder inmunogénico de las preparaciones evaluadas. Las preparaciones vacunales empleadas no solo fueron capaces de proteger al 100 por ciento de los hámsters contra el reto de la cepa homóloga, sino que también, en el caso de los hámsters inmunizados pasivamente, fueron capaces de prevenir la infección renal y elestablecimiento de leptospiras en órganos, evitando así el estado de portador, a diferencia de los controles noinmunizados, donde se obtuvo un 100 por ciento de mortalidad y se observaron serias lesiones a nivel de los órganosestudiados(AU)

The outer membrane components (OMC) might be useful as potential vaccine candidates. In this study rabbits and hamsters were immunized with OMC preparations obtained by SDS solubilization and adsorbed onto Aluminium hydroxyde gel. A twodosesschedule was used with an interval between doses of six weeks The animals were inoculated by intramuscular route.Doses of 25, 5 and 2,5 µg were used for hamsters and 25 µg for rabbits. The humoral response was evaluated bymicroagglutination (MAT) test and enzyme-linked immunoabsorbent assay (ELISA). In addition, the protective effect of the immune response induced was evaluated by challenge of the inoculated hamsters against 20 000 DL50 of homologous high virulent strain and by passive immunization using rabbits sera obtained on week 8th against 10 000 DL50. Results showedimmunogenic capacity of evaluated preparations which were able to protect all animals against challenge of homologous strain as well as to prevent renal infection and the establishment of leptospira in organs to avoid in this way carrier state in the case of hamsters passively immunized. The unvaccinated controls showed 100 percent of mortality and serious injuries in organs were observed(AU)

Estudio de toxicidad por dosis única y tolerancia local de una vacuna antimeningocócica tipo B en ratas Sprague Dawley / Study of toxicity by single dose and local tolerance of a meningococcal vaccine type B in Sprague Dawley

La vacuna antimeningocócica tipo B, objetivo de este estudio, contiene vesículas purificadas de la membrana externa del meningococo del serogrupo B de la cepa (Cu- 385 - 83 ) B:4:P1.19,15. El esquema de vacunación propuesto en humanos consiste en tres dosis de 0,5 mL, separadas por un intervalo óptimo de ocho semanas. El objetivo de este estudio de toxicidad en ratas Sprague Dawley (SD) fue determinar la toxicidad potencial, letalidad, órganos, sistemas susceptibles y otros eventos adversos, así como la toxicidad en el sitio de inoculación después de la administración de una dosis de la vacuna en estudio. Los resultados indicaron que, bajo las condiciones del estudio y según los criterios establecidos para evaluar los resultados, la vacuna antimeningocócica tipo B, no produce efectos tóxicos en el modelo animal usado. Todo lo que se observó fueron formaciones granulomatosas a nivel del punto de inoculación. Estas formaciones han sido reportadas como pertenecientes a los adyuvantes de depósito, como el hidróxido de aluminio, usado en otras vacunas parenterales. Se concluye que la vacuna antimeningocócica tipo B resultó satisfactoria en las pruebas de toxicidad por dosis única y tolerancia local realizadas en la especie rata(AU)

New method for obtaining conjugated vaccines.

We describe a new method to obtain conjugates against Neisseria meningitidis serogroups A, B, C, Vibrio cholera, and Salmonella typhi and their immunogenicity in Balb/c mice. The saccharides were activated by basic hydrolysis with the generation of amine groups in the saccharidic chain, and these groups were linked to carboxyl groups of tetanus toxoid by via carbodiimida-mediated reaction. The resultant conjugates were administered to mice for the immunogenicity studies. The pirogenicity of LPS was measured by LAL assay. The anti-saccharide IgG, IgG1, and IgG2a antibodies were evaluated. A significant decrease in the pirogenicity of LPS after basic hydrolysis treatment was observed. The conjugates elicited higher titers of anti-polysaccharides or anti-LPS IgG, IgG1, and IgG2a in conjugates than in unconjugated saccharides. The results indicate that we have a new method for obtaining conjugated vaccines and we have demonstrated that after conjugation there was a change in the responses for all saccharides, from thymus-independent to thymus-dependent responses.

The effect of the administration of human gamma globulins in a model of BCG infection in mice.

The effect of the administration of a commercial preparation of human gamma globulins has been evaluated in a mouse model of intranasal infection with BCG. First, we demonstrated the passage of specific antibodies to saliva and lung lavage following the intranasal or intraperitoneal administration to mice of human gamma globulins. This treatment of mice inhibited BCG colonization of the lungs (p < 0.01). A similar inhibitory effect was observed after infection of mice with gamma globulin opsonized BCG organisms (p < 0.01). These results are relevant for the development of new strategies for the control and treatment of tuberculosis.

Evaluación de la toxicidad por dosis única de la vacuna antidiftérica-antitetánica en ratas Sprague-Dawley / Evaluation of toxicity by single dose of the Diphtheria-Tetanus Vaccine in SpragueDawley rats

En el presente ensayo se evaluó la toxicidad por dosis única de la vacuna antitetánica antidiftérica (VA-DIFTET®) en ratas Sprague-Dawley. Para ello se utilizó la vía intramuscular por ser la propuesta a usar en humanos. Se administraron 0,3 mL de la vacuna o sus componentes a un total de 20 animales por grupo (10 de cada sexo). Los mismos se observaron diariamente: se midió el consumo de agua y alimento en días alternos y se determinó el peso corporal con intervalos semanales. Se incluyó el análisis anatomopatológico de los animales al final del estudio. Ninguno murió durante el ensayo ni se observaron síntomas clínicos. No hubo diferencias estadísticamente significativas (p>0,1) en cuanto al consumo de agua, alimentos y el peso corporal. En el estudio anatomopatológico se observaron lesiones granulomatosas macrofágicas en las ratas tratadas con la vacuna o con el placebo, hallazgo este característico delas vacunas adyuvadas con hidróxido de aluminio. Los resultados sugirieron que la vacuna VADIFTETes potencialmente inocua al administrar la dosis única por vía intramuscular(AU)

Evaluación de la toxicidad por dosis única y tolerancia local de la vacuna vax-SPIRAL en ratas Sprague Dawley

Las pruebas preclínicas de toxicidad en dosis única y en dosis repetidas brindan una valiosa información sobre la seguridad del producto, al incluir el estudio macroscópico e histopatológico de órganos importantes, así como evaluaciones de las vías de administración y el régimen de dosificación. Cuba desarrolló una vacuna polivalente de células inactivadas químicamente adyuvadas con hidróxido de aluminio, vax-SPIRAL®. Esta vacuna presenta ventajas en relación con otras vacunas como la procedente de la antigua URSS. El esquema de vacunación para humanos consiste en dos dosis de 0,5 mL, separadas por un intervalo óptimo de seis semanas.El objetivo de este estudio de toxicidad en ratas Sprague Dawley fue determinar la toxicidad potencial, letalidad, órganos y sistemas susceptibles y otros eventos adversos, así como la toxicidad en el sitio de inoculación después de la administración de una dosis de la vacuna en estudio. Los resultados indicaron que, bajo las condiciones en estudio y según los criterios establecidos para evaluar los datos obtenidos, la vacuna antileptospirósica trivalente no produce efectos tóxicos en el modelo animal usado. Las únicas alteraciones encontradas fueron formaciones granulomatosas a nivel del sitio de inoculación. Estas formaciones han sido reportadas como pertenecientes al adyuvante de depósito (hidróxido de aluminio), también usado en otras vacunas de aplicación parenteral(AU)

Long-term protective immune response elicited by vaccination with an expression genomic library of Toxoplasma gondii.

Immunization of BALB/c mice with an expression genomic library of Toxoplasma gondii induces a Th1-type immune response, with recognition of several T. gondii proteins (21 to 117 kDa) and long-term protective immunity against a lethal challenge. These results support further investigations to achieve a multicomponent anti-T. gondii DNA vaccine.

Evaluación de dos esquemas de inmunización para la / producción de sueros hiperinmunes contra Leptospira / interrogans / Evaluation of two immunization schedules for production of hyperimmune sera against Leptospira interrogans

Los antisueros policlonales utilizados para el serotipaje de cepas de Leptospira deben caracterizarse por un alto nivel de aglutininas específicas a un serogrupo o serovar determinado y una baja reactividad cruzada frente al resto de las serovariedades. El presente trabajo se desarrolló con el objetivo de evaluar y comparar dos de los esquemas de inmunización reportados para la obtención de sueros hiperinmunes específicos a Leptospira en conejos. Los esquemas recomendados fueron comparados por el Subcomité Taxonómico Internacional de Leptospira (TSCL) y por el Ministerio de la Agricultura de Cuba (MINAGRI), empleando dos antígenos de referencia correspondientes a los serogrupos Australis y Tarassovi. Se evaluaron las dinámicas de aglutininas desarrolladas frente a cada antígeno mediante cada esquema utilizando la técnica de aglutinación microscópica. Se evaluó asimismo la especificidad de los antisueros obtenidos frente a 11 serogrupos de Leptospira interrogans. Los títulos de aglutininas obtenidos mediante el esquema recomendado por el TSCL fueron superiores a los obtenidos mediante el esquema recomendado por el MINAGRI. Los antisueros producidos mediante ambos esquemas de inmunización fueron altamente específicos para sus respectivos serogrupos homólogos con ausencia de reactividad cruzada detectable por microaglutinación frente a todos los serogrupos heterólogos evaluados(AU)